在RPMI 1640培养基中，实验人员根据实验目的、实验需求有目的的添加补充物，对于RPMI 1640培养基中添加双抗这一步骤，相信很多实验人员都很熟悉。那为什么要在RPMI 1640培养基中添加双抗呢？这个问题值得我们思考，本文将从双抗是什么？双抗的添加比例以及双抗的储存条件三方面进行探讨，欢迎点击收藏呦！
1、双抗是什么：RPMI 1640培养基中的双抗是青霉素-链霉素混合液，这种双抗溶液是专门用于培养细胞的，可以直接添加到细胞培养液中。我们为什么要在RPMI 1640培养基中添加双抗呢？由于青霉素和链霉素都属于广谱抗生素，青霉素能阻止细胞壁的合成，使细菌高渗，使细菌破裂死亡；链霉素能抑制细菌繁殖过程中蛋白质的合成，是一种静止型杀菌剂，二者的作用地点不同，但都可以阻碍杂菌。在自然环境下，对链霉素敏感的生物绝大多数对青霉素都不敏感，反之亦是如此。这两种抗生素搭配几乎可以使常见细菌消失。
2、双抗的添加比例：实验人员在RPMI 1640培养基中添加双抗的比例一般使用100×的青霉素-链霉素溶液，例如，配制1000mL的细胞培养液时，在培养液中添加10mL的青霉素-链霉素溶液（100×），在配制完成后进行过滤除菌，就可以使用培养基了。市场上售卖的青霉素-链霉素溶液（100×）里青霉素的含量一般是10000单位/mL，链霉素的含量为10mg/mL。
3、双抗的储存条件：双抗一般应在-20℃至-80℃的温度间进行低温储存，这样的环境下可以减缓双抗的降解和变性，此外，双抗在4℃温度下不宜长时间放置，因此不建议在4℃温度下保存。在保存途中应该避免双抗反复冻融，反复的操作会使双抗的性能降低，建议在储存双抗时进行分装储存。在分装与使用时注意无菌操作，注意环境的清洁。在储存时要注意双抗的有效期，在使用双抗时可以将双抗放置在4℃环境下储存不超过4天。在使用时要根据实验需求进行稀释，不建议在换液时直接在培养基中添加双抗。
以上就是为什么在RPMI 1640培养基中添加双抗的原因以及添加双抗的比例和添加双抗所涉及到的注意事项的相关内容，欢迎留言讨论！返回搜狐，查看更多